|
如何挑选合适的elisa试剂盒■ 背景 Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。 如何挑选合适的elisa试剂盒? 1、查找待测样本的蛋白浓度 可以通过NCBI的文献,给出的蛋白表达量参考值来比较elisa试剂盒给出的样本值与报道值是否一致。 2、试剂盒的应用种属、检测样本的种类 除试剂盒特别说明外,一般不同种属不能通用。常见待测样本种类有:血清和血浆(不同抗凝剂),细胞上清,和细胞裂解液,试剂盒中不同样本的稀释液不混用。 3、•.检测范围: •建立线性范围:需测定9-11个浓度水平,每个浓度水平重复测定3-4次。 •验证标称线性参数:需测定4-6个浓度水平,每个浓度水平重复测定3-4次。 •所有样本应在一次运行中或几次间隔很短的运行中随机测定,最好在一天之内完成。 4、试剂盒的其它指标 a. 灵敏度: •示例:人IL-13的最低可检测浓度为0.1 pg/ml(6 次独立实验的平均值)。10 个零标准品浓度 OD 的平均值加上两倍SD,计算最低可检测浓度。 •注意:灵敏度跟检测范围最低点不相等。 b.•稳定性(重复性、精密性) •酶标板内精密度3 个已知浓度的样本酶标板内重复测定 20 次,评估酶标 板内的精密度。酶标板间精密度 3 个已知浓度的样本酶标板间重复检测 6 次,评估酶标板间的精密度。 •试剂盒一般板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% (统计学概念) 总结 •对于elisa试剂盒来说,正确的处理样本是保证检测准确性和正确性的一步。正式实验之前使用少量的样本进行预实验,可以选择2、5、10倍稀释样本,选择合适的稀释比例进行实验,这点非常重要!千万不能图省事,到时浓度太大超过检测限值,数据测不出,不仅费时费力,还要心疼咱的科研经费。同时,样本的保存也非常重要,保存不当或在冰箱里保存过久的样本,血清中lgG可聚合成多聚体,导致结果偏高。建议五天内检测的血清样本可短暂存放4℃,一周之后测定的血清样本应该低温冻存,同时切忌反复冻融。如果是血清样本,也要主要样本不能有溶血、脂血和细菌等残留,这些样本中存在非特异性显色影响结果。 九邦生物ELISA试剂盒 九邦生物是一家专业从事细胞生物学与免疫学相关的检测试剂的研发、生产、销售、服务的高技术企业,目前,已建立ELISA科研试剂盒、生化试剂盒、培养基、血清等生物科研用品的一站式服务平台,公司同时提供相关配套实验解决方案和检测服务,自成立之初,泉州九邦生物科技有限公司就认识到产品质量是企业高速成长的生命线;为此,在每一类产品的生产过程中,逐步建立起有针对性的、标准严格的生产工艺与质控体系,确保产品的规模化生产与质量稳定。同时,根据市场的需求,不断地进行产品改进与新产品研发,紧跟现代生物学研究与应用的前进步伐!致力于每位客户的满意和成功,为客户提供有竞争力的产品和解决方案,持续为客户创造大价值是泉州九邦生物科技有限公司一贯秉承的信念。 |